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    題名: 以小角度中子散射看熱效應對鄰苯二酚加氧酵素結構組態的影響
    作者: 王湘瑩;Xiang-Ying Wang
    貢獻者: 物理研究所
    日期: 2001-01-16
    上傳時間: 2009-09-22 10:52:27 (UTC+8)
    出版者: 國立中央大學圖書館
    摘要: 鄰苯二酚加氧酵素是一種苯環的開環酵素,可以用來分解苯環等 有機廢料,對清除環境中的有機污染物有很大的貢獻,但是這類酵素 的活性穩定度都不高,在高溫環境下其半衰期的時間都很短,造成應 用上的一大限制,因此這類酵素活性部位結構的探討,已成為許多生 物學家致力研究的方向。本論文利用小角度中子散射實驗,對鄰苯二 酚加氧酵素C23Onap(SH1)和C23Onap(NCIB9816-4)做酵素結構組態 與溫度效應的研究,同時針對另一酵素C23Otol(mt-2)進行緩衝溶液 成份對結構組態熱穩定性的影響。 在酵素活性的熱穩定性量測實驗中,酵素的活性半衰期會隨著時 間慢慢衰減,但是超過一定的溫度後其活性將會急速下降,在變溫的 過程中,酵素活性的衰減機制相同,可能都是因為酵素分子中的二價 鐵離子被氧化的結果,但其中以C23Onap(NCIB9816-4)的活性抗熱穩 定性比較高。 利用小角度中子散射實驗來研究酵素結構組態的熱穩定性,在低 溫時酵素的結構組態並沒有因為溫度改變而產生變化,但是當溫度超 過其臨界溫度之後,酵素分子的平均大小就明顯隨著溫度升高而急遽 增大,同時也發現C23Onap(NCIB9816-4)結構組態改變的臨界溫度要 比C23Onap(SH1)高出5℃。這種結構組態的改變主要是因為酵素分 II 子受熱,使其內部的次單位體體積擴張所造成的。經由不同成份緩衝 溶液中的樣品實驗,發現在緩衝溶液中添加適量的丙酮能提高結構組 態改變的臨界溫度,且在高溫時酵素分子大小隨溫度的變化較為緩 和,因此丙酮確實有助於提高酵素結構組態的熱穩定性。
    顯示於類別:[物理研究所] 博碩士論文

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