| 姓名 |
張平(Ping Chang)
查詢紙本館藏 |
畢業系所 |
物理學系 |
| 論文名稱 |
以吸取法研究抗菌小蛋白/脂膜系統
(Study of peptide/membrane system by aspiration method)
|
| 相關論文 | |
| 檔案 |
 [Endnote RIS 格式]
[Bibtex 格式]
 [相關文章]  [文章引用]  [完整記錄]  [館藏目錄]  [檢視] [下載]- 本電子論文使用權限為同意立即開放。
- 已達開放權限電子全文僅授權使用者為學術研究之目的，進行個人非營利性質之檢索、閱讀、列印。
- 請遵守中華民國著作權法之相關規定，切勿任意重製、散佈、改作、轉貼、播送，以免觸法。
|
| 摘要(中) |
抗菌小蛋白藉由吸附在細胞膜表面，進而產生穩定的孔洞來殺死細菌及微生物，其機制正被廣泛地研究，也有數種理論模型被提出。
本文將使用被廣為研究的蜂毒蛋白（melittin）和不同長度的磷脂質（Di22：1PC 和Di20：1PC）所製備的巨型微胞（GUVs）作用，並結合玻璃微管吸引法（Aspiration method）與螢光顯微鏡技術（Fluorescence microscopy），測量巨型微胞所產生的表面積增加ΔA，來與多片層X光繞射（Lamellar X-ray Diffraction, LXD）、指向性圓極化雙光譜技術（Oriented Circular Dichroism, OCD）的結果比較。
實驗結果顯示在溶液中蜂毒蛋白與巨型微胞胞膜作用的確會造成面積延展，且在開始形成孔洞時，巨型微胞胞膜面積延展率會達到一門檻值 。實驗測量結果如下：長的脂質分子Di22：1PC胞膜面積延展率門檻 ≒0.08；而短的脂質分子Di20：1PC胞膜面積延展率門檻 ≒0.06；此結果與已發表的X光片層繞射及圓極化雙光譜技術實驗結果吻合。
本論文提供一項新的且有效的技術來觀察在溶液中抗菌小蛋白與巨型微胞的作用；並進一步證明不論在溶液中巨型微胞或基底上多片層膜系統中，抗菌小蛋白吸附在胞膜表面，使面積延展，是膜上孔洞形成的機制。 |
| 摘要(英) |
Peptide binding in cell membranes can induce stable pores to kill the cell. This function has been studied extensively, yet few fundamental questions have not been answered, in particularly the dependence of peptide activity on the environment.
In this thesis, we study melittin interacting with giant unilamellar vesicle (GUV), the membrane in aqueous environment. The result was compared to the lamellar phase membrane on substrate, which has been studied by lamellar X-ray diffraction (LXD) and oriented circular dichroism (OCD). The aspiration method and fluorescence microscopy were combined to measure the membrane surface expansion ΔA. The result revealed that the membrane surface expansion ratio arrives at critical value , once pores are formed. Quantitatively, ≒0.08 for long chain lipid Di22：1PC whereas ≒0.06 for short chain lipid Di20：1PC, in agreement with the result for lamellar phase membrane studied LXD and OCD.
Our study provides a new useful technology to observe the interaction of peptides with lipids. And furthermore it proves that no matter membrane in aqueous environment or in lamellar phase on substrate, peptides have the same activities, namely, expanding membrane surface and inducing pores. |
| 關鍵字(中) |
★ 細胞膜
★ 脂膜
★ 抗菌小蛋白 |
關鍵字(英) |
★ melittin
★ peptide
★ di22:1PC
★ Di20:1PC
★ membrane |
| 論文目次 |
中文摘要................................... i
英文摘要.................................. ii
致謝..................................... iii
目錄...................................... iv
圖目....................................... v
表目..................................... vii
第一章 簡介................................ 1
第一節 生物細胞膜.................................... 1
第二節 抗菌小蛋白.................................... 3
第三節 Thinning effect and two-state model ........... 5
第四節 目前研究情形.................................. 7
第五節 本文的實驗方法及目的.......................... 9
第二章 實驗方法........................... 11
第一節 儀器及材料................................... 11
第二節 樣品製備..................................... 12
第三節 實驗步驟..................................... 16
第四節 測量GUV 的方法............................... 20
第三章 結果與討論......................... 24
第四章 結論............................... 33
參考資料.................................. 35 |
| 參考文獻 |
【1】歐陽鍾汕和劉寄星(1995)”從肥皂泡到液晶生物膜”，新世紀
物理研習叢書9，牛頓出板(台灣)
【2】洪偉清(2000)”脂膜的X-光片層繞射”，國立中央大學/物理
與天文研究所/88 年度/博士論文
【3】B. Albert, et al. (1994)”molecular biology of the cell”
3th edition, Garland publishing (New York & London)
【4】D. Hultmark, H. Steiner, T. Rasmuson and H. G. Boman (1980)
Eur. J. Biochem. 106:7.
【5】M. Zasloff (1987) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84:5449.
【6】H. W. Huang (2000) ”Action of antimicrobial
peptides:Two-state model” Biochemistry 39:8347-8352
【7】F.Y. Chen, M. T. Lee, and H. W. Huang (2003) ”Evidence
for Membrane Thing Effect as the Mechanism for
Peptide-induced Pore Formation” Biophys. J.
84:3751-3758
【8】F. Y. Chen, M.T. Lee, and H. W. Huanh (2002) ”Sigmoidal
Concentration Dependence of Antimicrobial peptide
Activities:ACase Study on Alamethicin” Biophys. J. 82:3751-3758
【9】W. Rawicz, K. C. Olbrich, T. Mclntosh, D. Needham, and E.
Evens (2000) ”Effect of Chain length and Unsaturation
on Elasticity of Lipid Bilayers” Biophysical Journal
79:328-339
【10】Marjorie L. longo, Alan J. Waring, Larry M. Gordon, and
Daniel A. Hammer (1998) ”Area Expansion and Permeation
of Phospholipid Membrane Bilayers by Influenza Fusion
Peptides and Melittin” American Chemical Society
14:2385-2395
【11】Rumiana Dimova, Said Aranda, Natalya Bezlyepkin, Vesselin
Nikolov, Karin A Riske and Reinhard Lipowsky (2006) ”A
practical guide to gaint vescles. Probing the membrane
naoregime via optical microscopy” J.Phys
18:S1151-S1176
【12】Ming-Tao Lee, Fang-Yu Chen, and Huey W. Huang
(2004) ”Energetics of Pore Formation Induced by
Membrane Active Peptides” Biochemistry 43: 3590-3599
【13】Angelova M I,Soleau S, Meleard P,Faucon J-F and Bothorel
P （1992） Preparation of giant vescles by extrnal AC
electric fields. Kinetics and application Prog. Colloid
Polym. Sci. 89:127-31 |
| 指導教授 |
陳方玉(Fang-Yu Chen)
|
審核日期 |
2007-7-16 |
| 推文 |
 facebook  plurk  twitter  funp  google  live  udn  HD  myshare  reddit  netvibes  friend  youpush  delicious  baidu
|
| 網路書籤 |
 Google bookmarks  del.icio.us  hemidemi myshare
|
